GSH Cas: 70-18-8 98% אבקה גבישית לבנה
| מספר קטלוגי | XD90227 |
| שם מוצר | GSH |
| CAS | 70-18-8 |
| נוסחה מולקולרית | C10H17N3O6S |
| משקל מולקולרי | 307.323 |
| פרטי אחסון | 2 עד 8 מעלות צלזיוס |
| קוד תעריף הרמוני | 29309098 |
מפרט מוצר
| מפרט מוצר | |
| נקודת המסה | 185 מעלות צלזיוס |
| כיתה | דרגת פארמה |
| מתכות כבדות | 10 עמודים לדקה מקסימום |
| אַרסָן | 2 עמודים לדקה מקסימום |
| זיהוי | IR: דומה לספקטרום הייחוס |
| הפסד על ייבוש | 0.5% מקסימום |
| טמפרטורת אחסון | +20 מעלות צלזיוס |
| משקל מולקולרי | 612.63 |
| בדיקה | 98.0% דקות |
| סיבוב אופטי | -15.5°- -17.5 מעלות |
| שאריות בהצתה | מקסימום 0.1% |
| בהירות הפתרון | ברור וחסר צבע |
| מראה חיצוני | אבקה גבישית לבנה |
| חומר קשור | סה"כ: 2.0% מקסימום, GSSG: 1.5% מקסימום |
חלבון ה-ORF45 של נגיף ההרפס הקשור לסרקומה של Kaposi (KSHV) הוא חלבון ספציפי לנגיף גמאהרפס מיידית-מוקדמת.מחקרים קודמים שלנו חשפו את תפקידיו המכריעים הן בשלבים המוקדמים והן בשלבים המאוחרים של זיהום KSHV.במחקר זה, סקרנו את האינטראקטום של ORF45 באמצעות פאנל של נוגדנים חד שבטיים.בנוסף לחלבוני הקינאז המוסדר החוץ-תאי (ERK) ו-p90 ribosomal S6 kinase (RSK) שזוהו בעבר, מצאנו עוד מספר חלבונים מטוהרים משותפים, כולל חלבונים בולטים של ~38 kDa ו-~130 kDa.ספקטרומטריית מסה גילתה שהחלבון של 38 kDa הוא ויראלי ORF33 והחלבון 130 kDa הוא תאי USP7 (פרוטאז 7 ספציפי לאוביקווטין).מיפינו את התחום המקשר ל-ORF33 ל-19 חומצות האמינו ה-Carboxyl-terminal שמורות ביותר (aa) של ORF45 ואת התחום המחייב USP7 למוטיב הקונצנזוס המדווח באזור המרכזי של ORF45.באמצעות צביעה אימונופלואורסצנטית, צפינו בקולקליזציה של ORF45 עם ORF33 או USP7 הן בתנאים שעברו טרנספקציה והן בתאים נגועים ב-KSHV.יתר על כן, שמנו לב למיקום מחדש תלוי ORF45 של חלק של ORF33/USP7 מהגרעין לציטופלזמה.מצאנו ש-ORF45 גרם לעלייה בהצטברות חלבון ORF33 שבוטלה אם התחום המחייב ORF33 או USP7 ב-ORF45 נמחק.יתר על כן, מחיקה של קצה הקרבוקסיל השמור של ORF45 בגנום KSHV הפחיתה באופן דרסטי את רמת החלבון ORF33 בתאים נגועים ב-KSHV וביטלה את הייצור של ויריון צאצאים.ביחד, התוצאות שלנו לא רק חושפות רכיבים חדשים של האינטראקטום ORF45, אלא גם מדגימות שהאינטראקציות בין חלבונים אלה חיוניות לשכפול ליטי של KSHV. ההרפסווירוס הקשור לסרקומה (KSHV) של Kaposi הוא הגורם הגורם למספר סוגי סרטן אנושיים.KSHV ORF45 הוא חלבון רב תכליתי שנדרש לשכפול ליטי של KSHV, אך המנגנונים המדויקים שבהם ORF45 מבצע את תפקידיו הקריטיים אינם ברורים.מחקרים קודמים שלנו גילו שכל ORF45 pr otein בתאים קיים בקומפלקסים בעלי משקל מולקולרי גבוה.לכן ביקשנו לאפיין את האינטראקטום של ORF45 כדי לספק תובנות לגבי תפקידיו במהלך שכפול ליטי.באמצעות פאנל של נוגדנים חד שבטיים, סקרנו את האינטראקטום ORF45 בתאים נגועים ב-KSHV.זיהינו שני שותפים חדשים לקישור של ORF45: החלבון הנגיפי ORF33 ופרוטאז 7 (USP7) ספציפי ל-Ubiquitin.אנו מדגימים עוד כי האינטראקציה בין ORF45 ו- ORF33 חיונית לייצור יעיל של חלקיקי נגיפי KSHV, דבר המצביע על כך שההפרעה הממוקדת לאינטראקציה זו עשויה לייצג אסטרטגיה חדשה לעיכוב שכפול ליטי של KSHV.
