מוצרים

אחד הגורמים המונעים יישום קליני של רפואה רגנרטיבית למחלות סחוס ניווניות הוא מקור מתאים לתאים.כונדרוציטים, סוג התאים היחיד של סחוס, הגדלים במבחנה בתנאי תרבית כדי להרחיב את מספר התאים מאבדים את הפנוטיפ שלהם יחד עם היכולת ליצור רקמה סחוסית היאלינית.במחקר זה אנו קובעים שמערכת תרבית תלת מימדית (3D) נטולת סרום ומגורמי גדילה משחזרת את יכולתם של הכונדרוציטים המועברים ליצור רקמת סחוס במבחנה, תהליך הכולל sox9. כונדרוציטים מפרקי בקר הועברו פעמיים ל לאפשר הרחבת מספר תאים (P2) ותרבותית בצפיפות גבוהה על ממברנות מצופות קולגן מסוג II בתלת מימד במדיה עם תכולת גלוקוז גבוהה בתוספת אינסולין ודקסמתזון (SF3D).התאים אופיינו לאחר התרחבות חד-שכבתית ובעקבות תרבית תלת-ממדית על ידי ציטומטריית זרימה, ביטוי גנים והיסטולוגיה.אופיינו השינויים המוקדמים במסלולי המרת אותות במהלך יון מחדש. תאי P2 הראו פרופיל אנטיגן דמוי אבות של 99% CD44(+) ו-40% CD105(+) ופרופיל ביטוי גנים המרמז על תאי בין-אזור.P2 ב-SF3D ביטא גנים כונדרוגניים ומטריצה ​​חוץ-תאית מצטברת.הורדת הוויסות של קולטן אינסולין (IR) עם HNMPA-(AM3) או מסלול קינאז PI-3/AKT (מופעל על ידי טיפול באינסולין) עם Wortmannin עיכב סינתזת קולגן.HNMPA-(AM3) הפחית ביטוי של גנים Col2, Col11 ו-IR וכן Sox6 ו-9.ניתוחים של שילוב אימונו-משקל וכרומטין של תאים שטופלו ב-HNMPA-(AM3) הראו קשירה של הקו-אקטיבים Sox6 ו-Med12 עם Sox9, אך מופחתת הקישור של Sox9-Col2a1. אנו מתארים שיטת תרבית חדשה המאפשרת להגדיל את מספר הכונדרוציטים ומקדמת היווצרות רקמת סחוס דמוית היאלין בחלקה על ידי קשירת Sox9-Col2a1 בתיווך אינסולין.יש לבחון את התאמת הרקמה שנוצרה באמצעות גישה זו לשימוש בתיקון מפרקים in vivo.