מוצרים

Mycobacterium tuberculosis יכולה להימשך עשרות שנים במארח האדם.מסלולי תגובה מחמירים הכוללים פוליפוספט אנאורגני [פולי(P)], אשר מסונתז ומועבר על ידי פוליפוספט קינאז (PPK) ואקסופוליפוספטאז (PPX), בהתאמה, ממלאים תפקיד רגולטורי מרכזי בהתמדה חיידקית.אנו מראים כאן שהצטברות פולי(P) של M. tuberculosis קשורה זמנית להגבלת גדילת חיידקים.אנו מזהים גם את M. tuberculosis Rv1026 כ-exopolyphosphatase חדש עם פעילות הידרוליטית נגד poly(P) שרשרת ארוכה.באמצעות מערכת ביטוי הניתנת להשראת טטרציקלין כדי להפיל את הביטוי של Rv1026 (ppx2), מצאנו שהצטברות M. tuberculosis poly(P) מובילה להאטה בגדילה ורגישות מופחתת לאיזוניאזיד, עמידות מוגברת לחום ול-pH חומצה ולשיפור ההישרדות התוך-תאית. במהלך זיהום מקרופאג.על ידי מיקרוסקופיה אלקטרונית העברה, זן ה-px2 נוק-דאון הראה עובי דופן תא מוגבר, אשר היה קשור לחדירות מופחתת של דופן התא לתרופות הידרופיליות במקום אינדוקציה של משאבות זרימת תרופות או שינוי ביצירת ביופילם ביחס לבקרת הווקטור הריקה.ניתוח טראנסקריפטומי ומטבולומי חשף הורדת הילוך מטבולית של נוק-דאון ppx2 המאופיין בשעתוק ותרגום מופחתים והורדת הילוך של רמות גליצרול-3-פוספט.לסיכום, פולי(P) ממלא תפקיד חשוב בהגבלת גדילת M. tuberculosis והורדת הילוך מטבולית ותורם לסבילות לאנטיביוטיקה באמצעות חדירות שונה בדופן התא. התגובה המחמירה, הכוללת את המולקולות הרגולטוריות פוליפוספט אנאורגני [poly(P)] ו-(p) )ppGpp, מאמינים שמתווך התמדה של Mycobacterium tuberculosis.במחקר זה, זיהינו אנזים חדש (Rv1026, PPX2) האחראי על הידרוליזה של פולי(P) שרשרת ארוכה.זן M. tuberculosis מהונדס גנטית, חסר בגן ppx2, הראה רמות פולי(P) מוגברות, שהיו קשורות לעצירת גדילה חיידקית מוקדמת והפחתת הרגישות לתרופת הקו הראשון איזוניאזיד, כמו גם עלייה בהישרדות החיידקים במהלך חשיפה ללחץ. תנאים ובתוך מקרופאגים.ביחס לזן הבקרה, המוטנט הראה עובי מוגבר של דופן התא וחדירות תרופה מופחתת.ביטוי גנים גלובלי וניתוח מטבוליטים חשפו ביטוי מופחת של מנגנון התעתוק והתרגום ושינוי בניצול מקור הפחמן.לסיכום, ויסות מאזן הפולי(P) הוא קריטי להיווצרות מתמשכת ב-M. tuberculosis.