מוצרים

CTP:phosphocholine cytidylyltransferase α (CCTα) הוא אנזים גרעיני המזרז את השלב המגביל את הקצב במסלול CDP-choline עבור סינתזה של פוספטידילכולין (PC).הפעלת שומנים של CCTα גורמת לטרנסלוקציה שלו למעטפת הגרעינית ולהתרחבות של רשת ממברנות תוך גרעינית המכונה הרטיקולום הנוקלאופלזמי (NR) על ידי מנגנון הכרוך בדפורמציה של הממברנה.למינים גרעיניים נדרשים גם ליציבות והתפשטות של ה-NR, אך לא ידוע האם המבנה הייחודי הזה, או הלמינה הגרעינית בכלל, נדרשת לסינתזת PC.כדי לבחון את הקשר הזה, הלמינה הגרעינית התרוקנה על ידי RNAi או שיבשה על ידי ביטוי של תסמונת פרוגריה של Hutchinson-Gilford (HGPS) מוטנטית למין A (פרוגרין), וההשפעה על חילוף החומרים של CCTα וכולין נותחה.השתקה בתיווך siRNA של lamin A/C או lamin B1 בתאי CHO להפחתת ה-NR לא השפיעה על סינתזת PC, בעוד כפולה כפולה עיכבה את המסלול באופן לא ספציפי.מה שמאשר את תפקידו המשני בסינתזה של PC, רק 10% מהפוספוטרנספראז של כולין/אתנולמין שהתבטא יתר על המידה חולף זוהה ב-NR.בתאי CHO, CCTα היה נוקלאופלזמי והתמקם יחד עם GFP-progerin בקפלים גרעיניים ובפלישות;עם זאת, פיברובלסטים של HGPS הציגו התפלגות חריגה של CCTα בציטופלזמה ובמעטפת הגרעינית אשר לוותה בהפחתה פי 2 בסינתזת PC.למרות הלוקליזציה השונה שלו, ניסויים של תיוג כולין הראו שפעילות CCT לא הושפעה, ועיכוב סינתזת ה-PC נעוץ בפעילות מופחתת של טרנספורטר כולין רגיש להמיכוליניום.אנו מסיקים כי CCTα ולמינים משתפים פעולה באופן ספציפי ליצירת ה-NR, אך למבנה הכולל של המעטפת הגרעינית יש השפעה מינימלית על פעילות CCT וסינתזת PC.