מוצרים

PIPES [piperazine-N,N'-bis(2-ethanesulfonic acid)] משמש לעתים קרובות כחומר חציצה בביוכימיה.זהו חיץ חומצה אתאן-סולפוני שפותח על ידי Good et al.בשנות ה-60.ל-PIPES יש pKa ליד ה-pH הפיזיולוגי מה שהופך אותו לשימושי בעבודת תרבית תאים.זה תועד כדי למזער אובדן שומנים בעת חציצה של היסטולוגיה של גלוטראלדהיד ברקמות צמחים ובעלי חיים. סוכן חציצה עם pKa ליד pH פיזיולוגי.

פפטיד אנטי-מיקרוביאלי magainin 2 יוצר נקבוביות בקרומי שומנים וגורם לחדירת ממברנה של תוכן התא.למרות שחדירת זו היא ככל הנראה הגורם העיקרי לפעילות קוטל החיידקים שלו, מנגנון היווצרות הנקבוביות נותר לא מובן.לכן חקרנו בפירוט את האינטראקציה של מגיינין 2 עם ממברנות שומנים באמצעות שלפוחיות חד-עליות ענקיות (GUVs).הקישור של magainin 2 לממברנת הליפיד של GUVs הגדילה את השינוי החלקי באזור הממברנה, δ, שהיה פרופורציונלי לריכוז פני השטח של magainin 2, X. זה מצביע על כך שקבוע הקצב של magainin 2 גרם לשניים מעבר מצב ממצב שלם למצב נקבוביות גדל מאוד עם עלייה ב-δ.המתח של קרום שומנים בעקבות שאיפת GUV הפעיל גם את היווצרות הנקבוביות המושרה על ידי Magainin 2.כדי לחשוף את המיקום של magainin 2, האינטראקציה של carboxyfluorescein (CF) מסומן magainin 2 (CF-magainin 2) עם GUVs בודדים המכילים בדיקה פלורסנטית מסיס במים, AF647, נחקרה באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית.בהיעדר מתח עקב שאיפה, לאחר האינטראקציה של מגיינין 2 עוצמת הקרינה של שפת ה-GUV עקב CF-magainin 2 עלתה במהירות לערך יציב, שנשאר קבוע במשך זמן רב, וב-4-32 שניות לפני כן. בתחילת הדליפה של AF647, עוצמת החישוק החלה לעלות במהירות לערך יציב אחר.לעומת זאת, בנוכחות המתח לא נצפתה עלייה בעוצמת החישוק רגע לפני תחילת הדליפה.תוצאות אלו מצביעות על כך ש-magainin 2 אינו יכול לעבור מהשכבה החיצונית אל הפנימית עד רגע לפני היווצרות הנקבוביות.בהתבסס על תוצאות אלה, אנו מסיקים כי נקבובית המושרה על ידי magainin 2 היא נקבובית המופעלת על ידי מתיחה ומתיחה של השכבה המונו-שכבה הפנימית היא הכוח המניע העיקרי של היווצרות הנקבוביות.