מוצרים

ניצול חנקן משופר בבקר חשוב על מנת להבטיח ייצור בר קיימא.מכיוון שפורינים ופירימידינים (PP) מהווים חלק ניכר מחנקן הרחם, הבנה משופרת של הספיגה והמטבוליזם המתווך של PP חיונית.העבודה הנוכחית מתארת ​​את הפיתוח והאימות של שיטה רגישה וספציפית לקביעה בו-זמנית של 20 פורינים (אדנין, גואנין, גואנוזין, אינוזין, 2'-דאוקסיגואנוזין, 2'-דאוקסיינוזין, קסנטין, היפוקסנטין), פירימידינים (ציטוזין, uracil, cytidine, uridine, thymidine, 2'-deoxyuridine), ותוצרי הפירוק שלהם (חומצת שתן, אלנטואין, β-alanine, β-ureidopropionic acid, β-aminoisobutyric acid) בפלסמת דם של פרות חולבות.הטכניקה המבוססת על כרומטוגרפיה נוזלית עם ביצועים גבוהים בשילוב עם ספקטרומטריית מסה טנדם של יינון אלקטרוספריי (LC-MS/MS) שולבה עם תקני כיול התואמים למטריצה ​​ותרכובות ייחוס יציבות עם תווית איזוטופית.לניתוח הכמותי קדם הליך חדשני של טיפול מקדים המורכב ממשקעים אתנול, סינון, אידוי וכינון מחדש.נחקרו פרמטרים להפרדה וגילוי במהלך ניתוח LC-MS/MS.זה אושר ששימוש במודל כיול לוג ולא במודל כיול ליניארי הביא ל-CV נמוך יותר ובדיקת חוסר התאמה הדגים רגרסיה ליניארית מספקת.השיטה מכסה טווחי ריכוז לכל מטבוליט בהתאם לזה שבדגימות בפועל, למשל גואנין: 0.10-5.0 מיקרומול/ליטר, ואלנטואין: 120-500 מיקרומול/ליטר.אחוז ה-CV עבור טווחי הכימות שנבחרו היה מתחת ל-25%.לשיטה יכולת חזרה טובה (CV%≤25%) ודיוק בינוני (CV%≤25%) והתאוששות מצוינת (91-107%).כל המטבוליטים הפגינו יציבות טובה לטווח ארוך ויציבות טובה בתוך ריצות (CV%≤10%).דרגות שונות של השפעות מטריקס מוחלטות נצפו בפלזמה, שתן וחלב.קביעת השפעות המטריצה ​​היחסיות העלתה כי השיטה מתאימה כמעט לכל מטבוליטי ה-PP שנבדקו בפלזמה שנלקחה מעורק ומוורידי הכבד, הכבד והקיבה והקיבה, ולמעט חריגים בודדים, גם למינים אחרים כגון עוף, חזיר, מינק, אדם וחולדה.