ONPG CAS:369-07-3 98.0% Min White To Off -אבקה לבנה
| מספר קטלוגי | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| שם מוצר | ONPG(2-Nitrophenyl-beta-D-galactopyranoside) |
| נוסחה מולקולרית | C12H15NO8 |
| משקל מולקולרי | 301.25 |
| פרטי אחסון | 2 עד 8 מעלות צלזיוס |
| קוד תעריף הרמוני | 29400000 |
מפרט מוצר
| טוהר (HPLC) | מינימום98.0% |
| מראה חיצוני | אבקה לבנה עד אוף-וויט |
| פִּתָרוֹן(1% במים) | תמיסה שקופה, חסרת צבע עד מעט צהובה |
| תכולת מים(קרל פישר) | מקסימום0.5% |
| סיבוב אופטי ספציפי [α]D20(c=1, H2O) | - 65.0 מעלות צלזיוס עד -73.0 מעלות צלזיוס |
דיון על מבחן ONPG (בדיקת β-galactosidase)
לאחרונה הועלו שאלות תכופות: 1. מדוע ניתן להשתמש במבחן ONPG כדי להבחין בתסיסה מושהית של לקטוז?2. מדוע התקן הלאומי קובע כי יש צורך להשתמש בברזל טריסכריד 3% נתרן כלורי (או ברזל טריסכריד) לבדיקת ONPG?3. עבור Vibrio parahaemolyticus, בעת ביצוע בדיקת OPNG, מדוע יש להוסיף טולואן בצורה טיפה לפי התקן?מהי הפונקציה?
החברה שלנו בחנה מידע רב, סיכמה אותו ושיתפה אתכם להלן:
עיקרון: השם הסיני של ONPG הוא o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside.ניתן לבצע הידרוליזה של ONPG לגלקטוז ואו-ניטרופנול צהוב (ONP) על ידי β-galactosidase, כך שניתן לזהות את הפעילות של β-galactosidase על ידי שינוי הצבע של מצע התרבות.
לקטוז הוא סוכר שרוב המיקרואורגניזמים צריכים לזהות.חילוף החומרים שלו דורש שני אנזימים, האחד הוא תא פרמיאז, לקטוז נכנס לתאים בפעולת פרמיאז;השני הוא β-galactosidase, אשר מבצע הידרוליזה של לקטוז לגלקטוז.לקטוז וגלוקוז.β-Galactosidase יכול גם לפעול ישירות על ONPG כדי להפוך אותו להידרוליזה לגלקטוז ואו-ניטרופנול צהוב (ONP).זה יכול להיעשות תוך 24 שעות, אפילו עם מתסיסים מושהים לקטוז.לכן, הוא מסביר את תוצאות התצפית של קטיף תרבית 1 מנטיית האגר וחיסונה במעגל שלם ב-36 מעלות צלזיוס למשך 1-3 שעות ו-24 שעות.אם מיוצר β-galactosidase, הוא יצהיב תוך 1-3 שעות, אם אין אנזים כזה, הוא לא ישנה את צבעו תוך 24 שעות.
על פי שני האנזימים לעיל, ניתן לחלק מיקרואורגניזמים לקטגוריות הבאות:
1 חיידק מתסיס לקטוז (18-24 שעות) עם permease ו-β-galactosidase P + G +;
2 מתסיסי לקטוז מושהים (הלוקחים יותר מ-24 שעות) חסרי פרמיאז אך בעלי גלקטוזידאז: P-G+.
3 מתסיסים שאינם לקטוז חסרים גם פרמיאז וגם גלקטוזידאז: P-G-.
ניתן להשתמש במבחן ONPG כדי להבחין בין חיידקי לקטוז-פיגור-תסיסה (P-G+) מחיידקי לקטוז שאינם מתסיסים (PG-), כגון:
1 הבדיל מתסיסי לקטוז מאוחרים (P-G+) מתסיסי לקטוז שאינם לקטוזים (P-G-).
(א) ציטרובקטר (+) ו- Salmonella arizonae (+) מסלמונלה (-).
(ב) Escherichia coli (+) מ- Shigella sonnei (-).
מדוע בוצע בדיקת ONPG באמצעות תרבית לילה על טריסכריד ברזל 3% נתרן כלוריד (תלת סוכר ברזל)?החברה שלנו התייעצה עם מידע רב, אך אין הצהרה ברורה.רק באתר ה-FDA נכתב כי "חסן תרביות לבדיקה על נטיות אגר ברזל משולשות סוכר ודגירה במשך 18 שעות ב-37 מעלות צלזיוס (או טמפרטורה מתאימה אחרת, במידת הצורך). נטיות אגר תזונתיות (או אחרות) המכילות 1.0 ניתן להשתמש גם ב-% לקטוז."פירוש הדבר: חיידקי הבדיקה חוסנו על מדיום ברזל טריסכריד ותופחו ב-37 מעלות צלזיוס למשך 18 שעות.קבילים גם נטיות אגר תזונתיות (או מדיום אחר) המכיל 1% לקטוז.לכן, ניתן להסיק שמדיום הברזל הטריסכריד מכיל לקטוז.לאחר גידול בן לילה, החיידקים ייצרו β-galactosidase פעיל טוב.באמצעות חיידקים כאלה, ONPG יכול להתפרק על ידי β-galactosidase מהר יותר.תופעת הניסוי מהירה יותר ובאה לידי ביטוי טוב יותר.בנוסף, תוספת טיפה של טולואן ואמבט מים למשך 5 דקות כולם על מנת לשחרר באופן מלא β-galactosidase.
