מוצרים

1. שיטות פרופיל מטבוליטים הן כלים חשובים למדידת מאגרי מטבוליטים במערכות ביולוגיות.בעוד שרוב שיטות פרופיל המטבוליטים מדווחות על עוצמות יחסיות או תלויות בכמה סטנדרטים פנימיים המייצגים את כל המטבוליטים, הדרישה הסופית לתיאור כמותי של מאגר המטבוליטים בתאים ביולוגיים ובנוזלים היא קביעת ריכוז מוחלט.אנו מדווחים כאן על שיטת פרופיל מטבוליטים ממוקדת עם תפוקה גבוהה ורגישה/ספקטרומטריית מסה טנדם (GC/MS/MS) המאפשרת כימות מוחלט של כל המטבוליטים שזוהו.השיטה מבוססת על נגזרת וכימות של מתיל כלורופורמט על ידי ספייק של דגימות עם תקני מטבוליטים שנגזרו בנפרד עם ריאגנטים לנגזרת דיוטרציה.יינון השפעת האלקטרונים המסורתי מוחלף ביינון כימי חיובי מכיוון שהאחרון משמר במידה רבה יותר את היון המולקולרי ושברי משקל מולקולרי גבוה אחרים.זה הקל על בחירת מעברי טרשת נפוצה/טרשת נפוצה ייחודית בין המטבוליטים המשולבים רבים.נכון לעכשיו, שיטת GC/MS/MS החדשנית כוללת 67 מטבוליטים ראשוניים נפוצים שרובם שייכים לקבוצות של חומצות אמינו אורגניות לא אמינו.אנו מראים את ישימות השיטה על דגימות שתן וסרום.השיטה מהווה שיפור משמעותי של המתודולוגיה הנוכחית לפרופיל GC/MS מטבוליטים כמותי של חומצות אמינו וחומצות אורגניות לא אמינו.

2.24S-Hydroxycholesterol (24OHC) ו-27-hydroxycholesterol (27OHC) הם שני אוקסיסטרולים דומים מבחינה מבנית ממקורות שונים - הראשון נוצר כמעט באופן בלעדי במוח והשני נוצר במידה פחותה במוח מאשר ברוב האיברים האחרים.השערה שיש לבחון: נזק נוירוני ו/או דה-מיילינציה גורמת לשטף מוגבר של 24OHC מהמוח לנוזל השדרה (CSF), ואילו מחסום דם-מוח פגם גורם לשטף מוגבר של 27OHC מהמחזור לתוך ה-CSF. נעשה שימוש בספקטרומטריה לבדיקת שני האוקסיסטרולים ב-CSF ובפלזמה של יותר מ-250 חולים עם מחלות נוירולוגיות וגריאטריות שונות. רמות ה-CSF של שני האוקסיסטרולים הושפעו הרבה יותר מהמחלות השונות מאשר רמות הפלזמה.לחולים עם מחלות דה-מיילינציה פעילות היו רמות מוגברות של 24OHC ב-CSF עם יחס גבוה יחסית של 24OHC/27OHC.לחולים עם דלקת קרום המוח באופן כללי היו רמות גבוהות של שני הסטרואידים עם יחס נמוך של 24OHC/27OHC.לחולים עם מחלת אלצהיימר היו רמות מוגברות מעט של 24OHC ב-CSF עם עלייה פחותה ב-27OHC.לחולים עם טרשת נפוצה הייתה נטייה לרמות גבוהות יותר של 24OHC במהלך תקופות פעילות עם יחס גבוה של 24OHC/27OHC. מדידות של שני האוקסיסטרולים ב-CSF ובפלזמה עשויות להוסיף באופן משמעותי לשיטות ביוכימיות קיימות להערכת מחלות נוירולוגיות.