מוצרים

Beta-D-2'-deoxy-2'-fluoro-2'-C-methylcytidine (PSI-6130) הוא מעכב ספציפי חזק של סינתזת RNA של נגיף הפטיטיס C (HCV) בתאי רפליקון Huh-7.כדי לעכב את הפולימראז של HCV NS5B RNA, PSI-6130 חייב להיות פוספוריל לצורת 5'-טריפוספט.נבדקו הזרחון של PSI-6130 והעיכוב של HCV NS5B.הזרחון של PSI-6130 על ידי רקומביננטי אנושי 2'-deoxycytidine kinase (dCK) ו-uridine-cytidine kinase 1 (UCK-1) נמדד על ידי שימוש בתגובה ספקטרופוטומטרית משולבת.הוכח כי PSI-6130 הוא מצע ל-dCK מטוהר, עם Km של 81 מיקרו-M ו-kcat של 0.007 s-1, אך לא היה מצע ל-UCK-1.PSI-6130 monophosphate (PSI-6130-MP) זרחן ביעילות לדיפוספט ולאחר מכן לטריפוספט על ידי UMP-CMP קינאז רקומביננטי אנושי ונוקלאוזיד דיפוספט קינאז, בהתאמה.נחקרה העיכוב של פולימראזות RNA RNA HCV NS5B מסוג פראי ומוטציה (S282T).קבוע העיכוב במצב יציב (Ki) עבור PSI-61 30 טריפוספט (PSI-6130-TP) עם האנזים הפראי היה 4.3 מיקרו-M.תוצאות דומות התקבלו עם 2'-C-methyladenosine triphosphate (Ki=1.5 microM) ו-2'-C-methylcytidine triphosphate (Ki=1.6 microM).NS5B עם המוטציה S282T, הידועה כמקנה עמידות ל-2'-C-methyladenosin, עוכבה על ידי PSI-6130-TP ביעילות לא פחות מהסוג הבר.שילוב של PSI-6130-MP לתוך RNA מזורז על ידי NS5B RNA פולימראז מטוהר הביא לסיום השרשרת.