מוצרים

γ-Glutamyltranspeptidases (γ-GTs) מבקעים את הקשר γ-glutamyl amid של גלוטתיון ומעבירים את קבוצת ה-γ-glutamyl המשוחררת למים (הידרוליזה) או חומצות אמינו מקבלות (transpeptidation).אנזימים אלה בכל מקום ממלאים תפקיד מפתח בביו-סינתזה ופירוק של גלוטתיון, ובניקוי רעלים קסנוביוטי.כאן אנו מדווחים על מבנה הגביש ברזולוציית 3Å של Bacillus licheniformis γ-GT (BlGT) ושל המתחם שלו עם l-Glu.מבני רנטגן מאשרים ש-BlGT שייך למשפחת ההידרולאזים הנוקלאופיליים ה-N-טרמינליים ומגלים שלחלבון יש שסע אתר פעיל פתוח דומה לזה שדווח על האנזים ההומולוגי מ-Bacillus subtilis, אך שונה מאלה שנצפו עבור γ-GT אנושי עבור γ-GTs ממיקרואורגניזמים אחרים.נתונים מצביעים על כך שהקישור של l-Glu גורם לסדר מחדש של זנב ה-C-טרמינלי של תת-היחידה הגדולה BlGT ומאפשרים זיהוי של מקבץ של שאריות חומצה שעשויות להיות מעורבות בזיהוי של יון מתכת.התפקיד של שאריות אלה על היציבות הקונפורמטיבית של BlGT נחקר על ידי אפיון העיבוד האוטומטי, הפעילות האנזימטית, הדנטורציה הכימית והתרמית של ארבעה מוטנטים בודדים של אלא.התוצאות מראות שהחלפת Asp568 ב-Ala משפיעה הן על העיבוד האוטומטי והן על היציבות המבנית של החלבון.