מוצרים

למעלה מ-70% מהגליומות בדרגה נמוכה נושאות מוטציה הטרוזיגטית R132H בגן המקודד לאיזוציטראט דהידרוגנאז 1 (IDH1).זה מקנה לאנזים את היכולת החדשה להמיר α-ketoglutarate ל-2-hydroxyglutarate, מה שמוביל בסופו של דבר לגידולים.המקור העיקרי לייצור 2-hydroxyglutarate הוא גלוטמין, שבסרטן הוא גם מקור לאנפלרוזיס של מחזור החומצה הטרי-קרבוקסילית (TCA).מקור חלופי לאנפלרוזיס הוא שטף פירובטים דרך פירובאט קרבוקסילאז (PC), שהוא מסלול נפוץ באסטרוציטים נורמליים.מטרת מחקר זה הייתה לקבוע האם PC משמש כמקור לאנפלרוזיס TCA בתאים מוטנטיים IDH1 שבהם נעשה שימוש בגלוטמין לייצור 2-hydroxyglutarate. נחקרו אסטרוציטים אנושיים נורמליים שהונצחו, שהונדסו לבטא מוטציה הטרוזיגטית IDH1 או IDH1 מסוג פראי.שטף פירובט דרך PC ודרך פירובאט דהידרוגנאז (PDH) נקבע על ידי שימוש בספקטרוסקופיה תהודה מגנטית כדי לחקור את התיוג של [2-¹³C]גלוקוז שמקורו ב-¹³C-labe led גלוטמט וגלוטמין.מבחני פעילות, RT-PCR ו-Western blotting שימשו כדי לחקור את הביטוי והפעילות של אנזימים רלוונטיים.נתוני גנום הסרטן (TCGA) נותחו כדי להעריך את הביטוי של אנזימים בדגימות גליומה אנושית. בהשוואה לתאים מסוג פרא, תאי IDH1 מוטנטיים הגדילו באופן משמעותי את השטף החלקי דרך PC.זה היה קשור לעלייה משמעותית בפעילות המחשב והביטוי.במקביל, פעילות PDH ירדה באופן משמעותי, ככל הנראה מתווכת על ידי זרחון מעכב PDH מוגבר באופן משמעותי על ידי PDH קינאז 3. בהתאם לתצפית בתאים, ניתוח נתוני TCGA הצביע על עלייה משמעותית בביטוי PC בדגימות גליומה אנושיות המבטאות IDH מוטנטיות בהשוואה לטבע- סוג IDH. הממצאים שלנו מצביעים על כך ששינויים ב-PC ו-PDH עשויים להיות חלק חשוב בהסתגלות התאית למוטציה IDH1 ועשויים לשמש מטרות טיפוליות פוטנציאליות.